Adenovirus Rapid Test-Nasal Secretion

การใช้งานที่ตั้งใจไว้:

SARS-CoV-2 ชุดทดสอบกรดนิวคลีอิกใช้กับการตรวจหากรดนิวคลีอิกของเชื้อโควิดในเชิงคุณภาพ-19ในผ้าเช็ดจมูก คอหอยและเสมหะ ผลการทดสอบให้พื้นฐานการวินิจฉัยระดับโมเลกุลสำหรับการติดเชื้อหรือผู้ป่วยต้องสงสัย และไม่ควรใช้เป็นเกณฑ์เดียวสำหรับการวินิจฉัยทางคลินิก

วัสดุ:

กระบวนการทดสอบ:

ก. การเตรียมตัวอย่าง

RNA ที่สกัดออกมาเป็นวัสดุเริ่มต้นสำหรับชุดทดสอบกรดนิวคลีอิก SARS-CoV-2

สำคัญ: ขั้นตอนการสกัดกรดนิวคลีอิกแต่ละขั้นตอนต้องดำเนินการพร้อมกันกับกลุ่มควบคุมที่เป็นบวกหนึ่งกลุ่ม (40 ไมโครลิตร, เจือจางด้วยสารละลายน้ำเกลือปลอดเชื้อ/PBS ถึงปริมาตรที่ต้องการ) และกลุ่มควบคุมเชิงลบหนึ่งชุด (40 ไมโครลิตร, เจือจางด้วยสารละลายน้ำเกลือปลอดเชื้อ/PBS ถึงปริมาตรที่ต้องการ)

ขอแนะนำให้ใช้ชุดสกัดกรดนิวคลีอิกเชิงพาณิชย์ต่อไปนี้: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); ไวรัส RNA มินิคิท (QIAGEN); TIANamp ชุด Hi-DNA/RNA (เทียนจิน);

B. การตั้งค่าผสมปฏิกิริยา

1. รีเอเจนต์และตัวอย่างทั้งหมดควรละลายจนหมด ผสมให้ละเอียด แล้วปั่นเหวี่ยงที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาสั้นๆ (ช่วงโดยประมาณ 18 ถึง 25 องศา ) ก่อนใช้งาน

2. เตรียมปริมาตรที่ต้องการของ Reaction Mix ในหลอดโพลีโพรพีลีนไมโครเซนตริฟิวจ์ที่มีขนาดเหมาะสม

3. ปิเปต 25 ไมโครลิตรของสารผสมปฏิกิริยาในแต่ละหลุมที่ต้องการของแผ่นปฏิกิริยา 96-หลุมเชิงแสงที่เหมาะสมหรือหลอดปฏิกิริยาเชิงแสงที่เหมาะสม

C. การเพิ่มเทมเพลต

1. เติม RNA ที่สกัดออกมา 5 ไมโครลิตรจากกลุ่มตัวอย่าง/กลุ่มควบคุมเชิงบวก/กลุ่มควบคุมเชิงลบ ปริมาตรรวม 30 ไมโครลิตร

2. ผสมตัวอย่างและตัวควบคุมอย่างละเอียดด้วย Reaction Mix โดยการปิเปตขึ้นและลง/Vortex

3. ปิดแผ่นปฏิกิริยา 96-หลุมที่มีฝาปิดที่เหมาะสมหรือฟิล์มกาวแบบออปติคัล และหลอดปฏิกิริยาที่มีฝาปิดที่เหมาะสม

4. ปั่นแยกแผ่นปฏิกิริยา 96-หลุมในเครื่องหมุนเหวี่ยงด้วยโรเตอร์แผ่นไมโครไทเทอร์เป็นเวลา 30 วินาทีที่ประมาณ 2500 รอบต่อนาที

D. การเขียนโปรแกรมเครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์

สำหรับข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับการตั้งค่าและการเขียนโปรแกรมเครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์ต่างๆ โปรดดูคู่มือผู้ใช้ของเครื่องมือนั้นๆ การทดสอบนี้ได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับระบบ ABI7500 Real-Time PCR การวิ่ง PCR ดำเนินการด้วยสภาวะการปั่นจักรยานตามที่อธิบายไว้ในตารางด้านล่าง

กำหนดเครื่องตรวจจับเรืองแสง

*โปรดตั้งค่าการอ้างอิงภายในอุปกรณ์เรืองแสงเป็น "ไม่มี" ตัวอย่างเช่น สำหรับเครื่องมือในซีรีส์ ABI ให้ตั้งค่า "การอ้างอิงแบบพาสซีฟ" เป็น "ไม่มี"

จ. การวิเคราะห์ข้อมูล

โปรดตั้งค่าพารามิเตอร์การวิเคราะห์และวิเคราะห์ข้อมูลตามคำแนะนำในการใช้งานเครื่องมือที่เกี่ยวข้อง

ใช้ ABI 7500 เป็นตัวอย่าง:

ควรตั้งค่าเส้นฐานเป็นช่วงที่ขจัดการเรืองแสงพื้นหลังซึ่งพบได้ในรอบแรกของการขยายสัญญาณ แต่ไม่ทับซ้อนกับพื้นที่ที่สัญญาณการขยายสัญญาณอยู่เหนือพื้นหลัง (ค่าเริ่มต้น:3~10; ค่าสิ้นสุด: {{2} }) ค่าเกณฑ์ของไซเคิล (Ct) ควรอยู่ในฐานของเฟสเลขชี้กำลัง คลิก "การวิเคราะห์" เพื่อรับผลการวิเคราะห์โดยอัตโนมัติ และอ่านผลการตรวจหาในหน้าต่าง "รายงาน"

ป้ายกำกับยอดนิยม: adenovirus การทดสอบการหลั่งของจมูกอย่างรวดเร็ว, จีน, ซัพพลายเออร์, ผู้ผลิต, โรงงาน, จำนวนมาก